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酵母双杂交技术服务在线咨询 科锐诺

作者:科锐诺      2024-08-24 08:55:50     30
1分钟前 酵母双杂交技术服务在线咨询 科锐诺[科锐诺44070b2]内容:首先,分子病理诊断为的诊断及鉴别诊断提供了依据,当遇到少见疑难或罕见病例时,尤其是通过形态学和免yi组化染色仍不能确定的类型,这时候就需要借助分子病理技术,从基因水平来判断疾病的异常情况,协助病理医生作出相对准确的诊断并判断该疾病的预后及转归。应用领域广泛的要数软组织和骨、淋巴造血系统,因为这些系统的相似而不同,单靠镜下表现和已知的已无法满足诊断需求。另外,分子病理检测也常常运用在分子分型中,比如大家熟知的分子分型,通过基因表达谱研究,可将分为管腔A型、B型,HER-2阳性型,基底样型。

分子病理学是20世纪70年代初,随着疾病的细胞生物学和分子生物学的发展和相互渗透的一个病理学分支学科。分子病理学是应用分子生物学理论、技术和方法,研究疾病发生1发展过程中蛋白质和核酸水平变化对疾病发生过程的影响及其作用,探讨疾病发生的分子机制,揭示疾病本质的现代病理学的分支学科。深入进行疾病分子病理学研究,将为疾病的精1准诊断和精1准治1疗提供重要的科学依据。

荧光原位杂交技(fish)原理:是利用荧光标记的特异核酸探针与细胞内相应的靶DNA分子或RNA分子杂交,通过在荧光显微镜或共聚焦激光扫描仪下观察荧光信号,来确定与特异探针杂交后被染色的细胞或细胞器的形态和分布,或者是结合了荧光探针的DNA区域或RNA分子在染色体或其他细胞器中的定位。

荧光原位杂交技(fish)实验步骤:

1、组织固定:组织取出洗净后立即放入固定液(DEPC水配制)中固定2-12h。

2、脱水:组织固定完成后经梯度酒精脱水后浸蜡,包埋。

3、切片:石蜡经切片机切片,摊片机捞片,62°烤箱烤片2h。

4、石蜡切片脱蜡至水:依次将切片放入二甲1苯Ⅰ 15min-二甲1苯Ⅱ 15min-无水乙醇Ⅰ 5min-无水乙醇Ⅱ 5min,风干,DEPC水浸泡。

5、消化:根据组织固定时间长短,切片于修复液中煮沸10分钟,自然冷却。后基因笔画圈,根据不同组织不同指标特性,滴加蛋白酶K(20ug/ml) 37°消化20min。纯水冲洗后PBS洗3次×5min。

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