本篇文章给大家谈谈引物浓度，以及跑pcr引物浓度对应的知识点，希望对各位有所帮助，不要忘了收藏本站喔。
pcr扩增时，引物浓度一般需要多大？加多少？
通常拿到的引物有1
OD或者2.5
OD等等
拿1
OD的引物来说
合成后通常有个说明书
1
0D的引物物质的量大概是在5
nmol
那么我们通常是加入500
uL的水稀释
这个时候引物的浓度是10
umol/L
也就是你用的浓度
如果取1
uL引物的话
物质的量是
10
umol/L
x
1
uL
=
10
x
10的负6次方
umol
=
10
pmol
一般而言25
uL的反应体系上下游引物各加入10
pmol，当然可以根据具体实验需要进行相应调整
关键就是看你一开始引物是怎么稀释的
然后慢慢换算就行了
pcr扩增时,引物浓度一般需要多大?加多少?
通常拿到的引物有1 OD或者2.5 OD等等
拿1 OD的引物来说
合成后通常有个说明书
1 0D的引物物质的量大概是在5 nmol
那么我们通常是加入500 uL的水稀释
这个时候引物的浓度是10 umol/L
也就是你用的浓度
如果取1 uL引物的话
物质的量是 10 umol/L x 1 uL = 10 x 10的负6次方 umol = 10 pmol
一般而言25 uL的反应体系上下游引物各加入10 pmol,当然可以根据具体实验需要进行相应调整
关键就是看你一开始引物是怎么稀释的
然后慢慢换算就行了
PCR反应引物浓度多少合适（工作液），储备液浓度多少？
储备液一般是100uM，也有稀释成10uM的。反正做PCR的最终其工作液终浓度范围是0.2μmol/L左右。我一般把引物稀释成10uM，25微升PCR体系一般加0.4-1.0微升的引物。
PCR引物浓度一般选多少
PCR引物浓度一般选5～20μmol/L。
PCR反应五要素：参加PCR反应的物质主要有五种即：引物(PCR引物为DNA片段，细胞内DNA复制的引物为一段RNA链）、酶、dNTP、模板和缓冲液（其中需要Mg2+）。
引物有多种设计方法，由PCR在实验中的目的决定，但基本原则相同。PCR所用的酶主要有两种来源：Taq和Pfu，分别来自两种不同的噬热菌。其中Taq扩增效率高但易发生错配。Pfu扩增效率弱但有纠错功能。所以实际使用时根据需要必须做不同的选择。
模板即扩增用的DNA，可以是任何来源，但有两个原则，第一纯度必须较高，第二浓度不能太高以免抑制。
缓冲液的成分最为复杂，除水外一般包括四个有效成分：缓冲体系，一般使用HEPES或MOPS缓冲体系；一价阳离子，一般采用钾离子，但在特殊情况下也可使用铵根离子；二价阳离子，即镁离子。
扩展资料
PCR技术的基本原理类似于DNA的天然复制过程，其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。PCR由变性-退火-延伸三个基本反应步骤构成：
①模板DNA的变性：模板DNA经加热至93℃左右一定时间后，使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离，使之成为单链，以便它与引物结合，为下轮反应作准备；
②模板DNA与引物的退火（复性）：模板DNA经加热变性成单链后，温度降至55℃左右，引物与模板DNA单链的互补序列配对结合；
③引物的延伸：DNA模板-引物结合物在72℃、DNA聚合酶（如TaqDNA聚合酶）的作用下，以dNTP为反应原料，靶序列为模板，按碱基互补配对与半保留复制原理，合成一条新的与模板DNA链互补的半保留复制链，重复循环变性-退火-延伸三过程就可获得更多的“半保留复制链”。
而且这种新链又可成为下次循环的模板。每完成一个循环需2～4分钟，2～3小时就能将待扩目的基因扩增放大几百万倍。
参考资料来源：百度百科-引物
引物浓度的介绍就聊到这里吧，感谢你花时间阅读本站内容，更多关于跑pcr引物浓度、引物浓度的信息别忘了在本站进行查找喔。
